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Plant Genomic DNA Kit

植物基因组DNA提取试剂盒

¥368.00

CW0553S

50 preps

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本试剂盒适用于从植物组织和植物干粉中提取总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及叶绿体DNA。本品可以处理多至100 mg的样本,可纯化获得最大为50 kb的DNA,多数片段在 20-30 kb 之间。本试剂盒采用先进的硅胶膜技术和简单的离心程序,无需乙醇沉淀,简单快速地分离得到高纯度的DNA,有效去除PCR和其他酶促反应的抑制剂。本品可以在1小时内完成总DNA的提取,纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
保存条件 运输条件
RT(15-30℃) 常温
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Q1:Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀该如何解决?
A1:

Buffer GP1Buffer GP2出现结晶或沉淀,可将其置于65℃水浴至重新溶解。

Q2:提取的DNA出现RNA污染该如何解决?
A2:

如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在加入Buffer GP1孵育后,加入4 μL DNase-FreeRNase A100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:CW0601S。

Q3:组织裂解时需要注意什么?
A3:

Buffer GP1 需预热至65℃,并加入β-巯基乙醇(终浓度0.1%)。裂解时需充分颠倒混匀,确保组织完全裂解。

Q4: 吸附柱堵塞怎么办?
A4:

若上样液粘稠,可分次加入吸附柱离心。避免吸入步骤3中的下层有机相或沉淀。

Q5:能否用水洗脱DNA?
A5:

若下游实验对pH值或EDTA敏感,可采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节),pH值低于7.0会显著降低洗脱效率。如需长期保存洗脱产物,推荐使用Buffer GE,并于-20℃保存。

Q6:提取的DNA产量低的解决办法?
A6:

(1) 样本起始投入量不要超过所用方法的起始量标准;

(2) 样品保存时要尽可能的避免反复冻融;

(3) 样本应进行充分裂解:确保组织在液氮中充分研磨,并充分涡旋混合。

(4) Buffer GW1和Buffer GW2中无水乙醇添加量不准确或漏加:应按照试剂瓶标签正确添加无水乙醇;

(5) 确保无乙醇残留:空离后将吸附柱开盖室温静置数分钟,彻底挥发乙醇。6 洗脱不充分: DNA 产物洗脱的时候,预热洗脱液并滴加在膜中央位置,尽可能的覆盖整个吸附膜,增加洗脱体积或者二次洗脱也可增加产量。

Q7:提取的 DNA 纯度低的原因及该解决办法?
A7:

1. A260/A280比值低(<1.7)。原因:蛋白或乙醇残留导致污染。解决方法:

1) 确保裂解充分:使用前请检查裂Buffer GP1和Buffer GP2是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,于56℃水浴孵育至重新溶解。 

2) 去除乙醇残留:吸附柱空离2分钟后将吸附柱开盖置于室温数分钟,以彻底晾干。

2. A260/A280比值高(>2.0)。原因:核酸降解。

解决方法:

1) 避免降解:使用新鲜样本,避免样本反复冻融。

2) 优化洗脱:若采用灭菌水作为洗脱液。使用前需调节水的pH值至7.0-8.5(可用NaOH调节)。

 

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